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二手LCMSMS 儀器參數10步優(yōu)化技巧

更新時間:2019-08-21      點擊次數:1670

二手LCMSMS 系統(tǒng)具有非常高的靈敏度、選擇性、重現(xiàn)性,在蛋白與肽藥物代謝機理及動力學研究等方面,都可快速提供穩(wěn)定、可靠的結果。為了能夠實現(xiàn)其功能,京科瑞達二手為您整理出關于二手LCMSMS 儀器參數的10步優(yōu)化技巧,下面我們進入正題!

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二手LCMSMS 儀器參數10步優(yōu)化技巧

 

1, CA*校準,用PPG或-己知化合物檢驗,如偏差不大,可以不用做質量校準,但偏高偏低要心中有數;

 

2, 先用濃度大約0.1-1 ppm的標樣,通過Syringe Pump以5-10ul/min優(yōu)化Compound項下面的參數,如DP、CE、EP、CXP及CAD等;

 

3, 順序: Q1 Scan Product lon Scan +MRM ;

 

4, 不同化合物參數有可能差別很大,接通LC用FIA優(yōu)化其他參數及源位置,或接一個三通,樣品仍由注射泵進入離子源,同時LC保持需要的流量,優(yōu)化溫度和Gas1及Gas2,CXP、CAD、EP優(yōu)化后通常不用再改,在保證樣品充分離子化的基礎上,DP低些可使母離子豐度提高,總靈敏度相應提高;

 

5, 質量范圍不要太寬,涵蓋待測離子再增加20-30amu即可采樣時間適當長些可使噪聲降低:當同時檢測數上對離子時,MRM采樣時間可以降全數十毫秒,而檢測離子對不多時,每對離子可使用200毫秒左右;

 

6, 母、子離子輸入的質量數值要選準,要根據Q1 Scan及ProductIonScan得到的結果輸入,準確到0.1amu。當不能確定準確質量數時,可選待測質量數上下各0.1amu,同時數對離子進行優(yōu)化,終于找出靈敏度上佳的一對離子。例如320.9-152.0、321.0-152.0、321.1-151.9...,若樣品較雜,同一化合物需要選擇幾對母、子離子,經進樣實驗找出哪對有干擾,去掉,保留7不易受十擾的1~ 2對離子;

 

7, 每對離子各參數分別設,如DP, CE,Time等,對較弱離子對,采樣時間可適當長些;

 

8, 手動運行Ramp進行參數優(yōu)化, 各參數分別優(yōu)化,Step選小此,范圍不用太寬,每個參數重復優(yōu)化兩次,以減小偶然誤差。手動優(yōu)化效果比自動優(yōu)化(Auto)效果好,根據LC流量和流動相組成確定溫度Tem、Gas1及Gas2。當流量大,水相多時,溫度及氣流要大,但注意Gas2與Tem的關系。離子源噴霧位置是根據LC流量調節(jié)的,基本流量固定,位置就固定;

 

9, 噴霧電壓太高有可能導致放電;

 

10, 許多參數五相影響,需要耐心地反復細調,使信噪比得以改善。

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